人源表皮黑色素细胞-Light来源于浅色肤色个体的表皮基底层,通过合成和转运黑色素决定肤色。这类细胞将黑色素体通过树突转运至周围角质形成细胞,提供紫外线防护,是研究色素沉着机制、白癜风和黑色素瘤的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源表皮黑色素细胞-Light
组织来源:人正常皮肤组织(浅色肤色)
细胞形态:梭形或树突状,胞体较小,伸出多个细长树突
生长特性:贴壁生长,密度低时呈放射状排列
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基: melanocyte专用培养基,添加FGS、TPA、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
包被条件:推荐使用Ⅰ型胶原蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源表皮黑色素细胞-Light经Melan-A免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源表皮黑色素细胞-Light采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过黑色素细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管;酒精擦拭管壁;细胞悬液加入黑色素细胞专用完全培养基;离心弃上清;重悬接种于明胶包被培养瓶,培养箱孵育。
细胞换液:复苏 24 h 换液;PBS 轻洗细胞层;预热新鲜黑色素细胞完全培养基;每 2‑3 天换液一次。
细胞传代:汇合度 70‑75%;黑色素细胞不要长满;弃培养基 PBS 清洗;胰酶‑EDTA 短时间消化 2‑4 min;镜下细胞回缩;黑色素完全培养基终止消化。
细胞消化收集:轻柔吹打瓶壁收集单细胞悬液;离心重悬;传代比例 1:2;黑色素细胞贴壁不牢,动作轻柔。
细胞冻存:收集对数生长期低代次细胞沉淀;黑色素细胞冻存液重悬;1‑2×10⁶细胞 /mL;分装冻存管液氮保存。
细胞形态观察鉴定:树突状多突起形态;TYRP‑1、S‑100 黑色素标志物染色鉴定。
细胞污染应急处理:污染瓶丢弃隔离;超净台灭菌;剩余细胞换液 + 双抗监测。
