人源肺成纤维细胞是肺间质的主要细胞类型，合成并分泌胶原蛋白、弹性蛋白等细胞外基质成分。这类细胞在维持肺组织结构、参与损伤修复和纤维化进程中发挥核心作用，是研究肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病等的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源肺成纤维细胞
组织来源：人正常肺组织
细胞形态：长梭形或不规则三角形，呈成纤维细胞样
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状排列，高密度时呈漩涡状
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:4比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的人源肺成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源肺成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过成纤维细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管；酒精擦拭管壁；细胞悬液移入成纤维细胞完全培养基；离心弃上清；重悬接种于普通培养瓶，放入培养箱。
细胞换液：复苏 24 h 换液去除死细胞碎片；PBS 轻洗细胞；预热新鲜成纤维完全培养基；每 2‑3 天换液一次。
细胞传代：汇合度 85‑90%；弃培养基 PBS 清洗；胰酶‑EDTA 消化 3‑5 min；镜下细胞回缩、梭形变圆；成纤维完全培养基终止消化。
细胞消化收集：吹打瓶壁，单细胞悬液；离心重悬；传代比例 1:3~1:4；成纤维细胞增殖快。
细胞冻存：收集对数生长期细胞沉淀；成纤维细胞冻存液重悬；1‑2×10⁶细胞 /mL；分装冻存管液氮保存。
细胞形态观察鉴定：长梭形、漩涡状生长波形蛋白 Vimentin 免疫染色鉴定。
细胞污染应急处理：污染瓶移出丢弃；操作台消毒；剩余细胞换液加双抗监控。
