人源近端肾小管上皮细胞构成近端肾小管壁，是肾脏重吸收的主要部位。这类细胞负责重吸收原尿中几乎全部葡萄糖、氨基酸和大部分水、钠离子，并分泌多种代谢废物和药物，在急性肾损伤、药物肾毒性和肾小管疾病研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源近端肾小管上皮细胞
组织来源：人正常肾脏皮质组织
细胞形态：上皮细胞样，多角形或立方形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，需依赖细胞外基质支撑
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：上皮细胞专用培养基，添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素等生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)或Matrigel基质胶包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源近端肾小管上皮细胞经AQP1免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源近端肾小管上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：冻存管 37℃水浴速融；酒精消毒外壁；悬液加入肾小管上皮完全培养基；离心弃上清；重悬接种于胶原包被瓶，37℃、5% CO₂培养。
细胞换液：复苏 24 h 首次换液；PBS 轻洗细胞单层；预热新鲜肾小管上皮完全培养基；每 2‑3 天换液一次。
细胞传代：汇合 80%；弃培养液 PBS 清洗 2 次；胰酶‑EDTA 消化 3‑5 min；镜下细胞回缩；上皮完全培养基终止消化。
细胞消化收集：轻柔吹打瓶壁，单细胞悬液；离心重悬；传代比例 1:2‑1:3，肾小管上皮传代次数有限。
细胞冻存：取低代次健康细胞沉淀；上皮冻存液重悬；1‑2×10⁶细胞 /mL；分装冻存管液氮保存。
细胞形态观察鉴定：多边形上皮铺路石；AQP‑1、E‑cadherin 标志物鉴定。
细胞污染应急处理：污染样本丢弃；超净台全面消毒；剩余细胞换液 + 双抗观察。
