人源赛尔托利细胞（Sertoli细胞）是睾丸曲细精管中的支持细胞，为生精细胞提供营养和结构支持。这类细胞构成血睾屏障，分泌雄激素结合蛋白和抑制素，调节精子发生，在男性生殖和男性不育研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源赛尔托利细胞
组织来源：人正常睾丸组织
细胞形态：不规则形或柱状，胞体较大
生长特性：贴壁生长，密度低时呈散在分布
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：DMEM/F12培养基，添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
包被条件：推荐使用Matrigel基质胶包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源赛尔托利细胞经GATA-4免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源赛尔托利细胞采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过赛尔托利细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：冻存管 37℃水浴速融；酒精消毒外壁；悬液转入赛尔托利细胞专用完全培养基；离心弃上清；重悬接种于多聚‑L‑赖氨酸包被瓶，37℃培养。
细胞换液：复苏 24 h 首次换液；PBS 轻洗单层细胞；更换预热赛尔托利完全培养基；每 2‑3 天换液一次。
细胞传代：汇合度 80%；弃培养液 PBS 洗涤；胰酶‑EDTA 消化 3‑5 min；镜下细胞回缩；完全培养基终止消化。
细胞消化收集：轻柔吹打瓶壁制成单细胞悬液；离心重悬；传代比例 1:2‑1:3，赛尔托利细胞增殖较慢。
细胞冻存：取低代次健康细胞沉淀；专用冻存液重悬；1‑2×10⁶细胞 /mL；分装冻存管液氮保存。
细胞形态观察鉴定：不规则多边形；WT‑1、SOX9 标志物免疫鉴定。
细胞污染应急处理：污染样本丢弃隔离；超净台消毒；剩余细胞换液添加双抗观察。
