人源主动脉平滑肌细胞位于主动脉中膜层,通过收缩和舒张调节血管张力。这类细胞在维持血管壁弹性和血压调节中发挥核心作用,在动脉粥样硬化、主动脉瘤和血管再狭窄等血管疾病中发生表型转化,是研究血管重塑机制的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源主动脉平滑肌细胞
组织来源:人正常主动脉组织
细胞形态:长梭形或不规则形,呈成纤维细胞样外观
生长特性:贴壁生长,低密度时交织成网状,高密度时呈旋涡状或栅栏状排列
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:平滑肌细胞专用培养基,添加FBS、胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子(EGF)等生长添加剂
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:4比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
体外寿命:可传代培养5-8代,建议在P3-P5代进行实验
质量检测 quality test
实验室分离的人源主动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源主动脉平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过平滑肌细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管;酒精擦拭管壁;细胞悬液转入血管平滑肌完全培养基;离心弃上清;重悬接种于普通培养瓶,放入 37℃培养箱。
细胞换液:复苏 24 h 换液;PBS 轻洗细胞层;预热新鲜平滑肌完全培养基;每 2‑3 天换液一次。
细胞传代:汇合度 85‑90%;弃培养液 PBS 清洗;胰酶‑EDTA 消化 3‑5 min;镜下梭形细胞回缩;平滑肌完全培养基终止消化。
细胞消化收集:吹打瓶壁,单细胞悬液;离心重悬;传代比例 1:3‑1:4;平滑肌增殖较快。
细胞冻存:取低代次对数生长期细胞沉淀;平滑肌细胞冻存液重悬;1‑2×10⁶细胞 /mL;分装冻存管液氮保存。
细胞形态观察鉴定:长梭形,汇合后呈 “峰‑谷” 生长模式;α‑SMA 平滑肌肌动蛋白染色鉴定。
细胞污染应急处理:污染瓶丢弃隔离;超净台消毒;剩余细胞换液添加双抗监控。
