大鼠骨细胞分离自腿骨骨组织；骨组织的细胞成分包括骨原细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞。只有骨细胞存在于骨组织内，其他三种细胞均位于骨组织的边缘。骨细胞（Osteocyte）是人体骨骼中最主要的细胞成分。在成年人骨骼中，骨细胞占细胞总数量的90%-95%，大约是成骨细胞数量的20倍。骨细胞生长在骨骼内部的骨基质中。骨细胞的细胞体呈梭形或类圆形，位于基质构成的骨陷窝内。与神经细胞类似，每个骨细胞具有大量向外延伸的突触，而这些突触均位于由骨基质构成的骨小管结构中。通过这些突触，骨细胞能够与骨表面的细胞、周围其它的骨细胞进行“交流”。普遍认为，骨细胞起源于成骨细胞。在骨形成的终末阶段，成骨细胞将可能有3种不同的归宿：分化成为骨细胞、转移至骨表面成为暂不活动的成骨细胞、进入程序死亡过程（凋亡）。骨细胞为扁椭圆形多突起的细胞，核亦扁圆、染色深。胞质弱嗜碱性。电镜下，胞质内有少量溶酶体、线粒体和粗面内质网，高尔基复合体亦不发达。骨细胞夹在相邻两层骨板间或分散排列于骨板内。相邻骨细胞的突起之间有缝隙连接。在骨基质中，骨细胞胞体所占据的椭圆形小腔，称为骨陷窝，其突起所在的空间称骨小管。相邻的骨陷窝借骨小管彼此通连。骨陷窝和骨小管内均含有组织液，骨细胞从中获得养分。
产品属性 product attributes
产品名称 大鼠骨细胞
组织来源 腿骨骨组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
培养基： 大鼠骨细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形
传代比例： 不传代
传代特性： 不增殖；不传代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠骨细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测 quality test
实验室分离的大鼠骨细胞经骨钙素免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的大鼠骨细胞采用胶原酶消化法制备而来。
操作步骤 operation steps
一、实验前准备
1. 试剂：胶原酶混合液、EDTA 脱钙液、α-MEM 培养基；显微解剖器械、滤网
二、取材与预处理
1. 取大鼠长骨，剔除所有软组织，纵向剖开骨质，刮除骨髓与骨内膜
2. PBS 反复冲洗骨段表面
三、细胞分离与消化
1. 依次使用胶原酶消化 3 轮，每轮 30min 去除成骨细胞
2. 再用 EDTA 溶液孵育脱矿释放陷窝内骨细胞，收集所有消化液
四、纯化与接种培养
1. 消化液混合过滤离心，PBS 洗涤沉淀
2. 专用骨细胞维持培养基接种铺板，低浓度血清培养
3. 每 2~3 天换液，尽量减少传代避免细胞凋亡
