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人Ⅱ型肺泡上皮细胞

人Ⅱ型肺泡上皮细胞

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产品概述 product description

人Ⅱ型肺泡上皮细胞分离自肺组织;肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管,它们的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即为肺泡。小肺泡细胞,又称I型肺泡细胞,厚约0.1微米,基底部是基底膜,无增殖能力。大肺泡细胞,又称Ⅱ型肺泡细胞,分泌表面活性物质(二棕榈酰卵磷脂),以降低肺泡表面张力。Ⅱ型肺泡细胞位于Ⅰ型肺泡细胞之间,数量较Ⅰ型肺泡细胞多,但覆盖面积比Ⅰ型肺泡细胞小。细胞立方形或圆形,顶端突入肺泡腔。细胞核圆形,胞质着色浅、呈泡沫状。电镜下,细胞游离而有少量微绒毛,胞质内富含线粒体和溶酶体,有较发达的粗面内质网和高尔基复合体。核上方有较多的分泌颗粒,电子密度高、大小不等,直径约0.1-1.0 μm颗粒内含有平行排列的板层状结构,称为嗜饿性板层小体。小体内的主要成分为磷脂,以二棕榈酰卵磷脂为主,此外还有糖胺多糖及蛋白质等。颗粒内物质释放出来后,在肺泡表面形成一层粘液层,称为表面活性物质(surfactant)。表面活性物质有降低肺泡表面张力、稳定肺泡大小的作用。呼气时肺泡缩小,表面活性物质密度增加,表面张力降低,防止肺泡过度塌陷;吸气时肺泡扩张,表面活性物质密度减小,肺泡回缩力加大,可防止肺泡过度膨胀。表面活性物质的缺乏或变性均可引起肺不张,过度通气可造成表面活性物质缺乏;吸入毒气可直接破坏表面活性物质。Ⅱ型肺泡细胞有分裂、增殖并分化为Ⅰ型肺泡细胞的潜能,故具有修复受损伤上皮的作用。

产品属性 product attributes

产品名称 人Ⅱ型肺泡上皮细胞

组织来源 肺组织

默认种属 人,其他咨询
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)

培养基: 人Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 每2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 上皮细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传1-2代左右

消化液: 0.25%胰蛋白酶

人Ⅱ型肺泡上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测 quality test

实验室分离的人Ⅱ型肺泡上皮细胞经SP-C免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介 method

实验室分离的人Ⅱ型肺泡上皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。

操作步骤 operation steps

标本无菌处理:人肺组织标本预冷双抗 PBS 灌洗肺泡腔,清除血液与痰液

弹性蛋白酶消化:37℃恒温消化肺组织块,释放肺泡上皮细胞团

负选纯化:免疫磁珠去除肺成纤维、内皮杂细胞,富集 Ⅱ 型肺泡上皮

肺泡专用培养:添加肺上皮生长因子、氢化可的松维持细胞表型

肺泡成熟诱导:融合 70% 更换分化培养基,促进板层小体表达

损伤造模:建立缺氧 / 脂多糖诱导肺泡上皮损伤模型,分组给药干预

冻存质控:SP-A 免疫荧光鉴定阳性后,梯度降温冻存,严控传代次数