人源冠状血管内皮细胞覆盖于心脏冠状动脉内壁，构成血管腔面。这类细胞通过分泌NO等血管活性物质调节冠脉张力，维持心肌供血，参与冠状动脉粥样硬化、冠心病等心血管疾病的发生发展，是研究心脏血管疾病的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源冠状血管内皮细胞
组织来源：人正常心脏冠状血管组织
细胞形态：多角形或短梭形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，接触抑制明显
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：内皮细胞专用培养基，添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源冠状血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源冠状血管内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作：超净台紫外灭菌；冠脉内皮专用完全培养基 37℃预热；明胶包被 T25 培养瓶备用。
冻存细胞解冻复苏：冻存管取出液氮，37℃水浴快速摇晃融化。
稀释悬液：冻存管酒精消毒，细胞悬液缓慢滴入 5 mL 预热内皮培养基混匀。
离心沉淀细胞：1000 rpm 室温离心 5 min。
重悬沉淀：弃上清废液，加入 2‑3 mL 冠脉内皮培养基轻柔吹打重悬。
接种包被培养瓶：悬液转入包被 T25 瓶，补足培养基至 5 mL，十字摇匀。
孵育培养：37℃、5% CO₂培养箱；48 h 镜检贴壁，2‑3 天换液。
