人肝星状细胞位于肝脏Disse间隙内,是肝脏细胞外基质的主要调控细胞。正常情况下处于静止状态,富含维生素A脂滴,约占肝脏细胞总数的8%-13%。当肝脏受到炎症、损伤或纤维化刺激时,细胞会被激活,转化为肌成纤维细胞样细胞,大量分泌胶原蛋白和细胞外基质,成为肝纤维化形成的关键细胞。
产品属性 product attributes
产品名称: 人肝星状体细胞
组织来源:人正常肝脏组织
细胞形态:长梭状或星状细胞,胞体圆形或不规则形,伸出数个星状胞突
生长特性:贴壁培养,密度低时呈放射状排列,高密度时重叠生长
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:人肝星状细胞专用培养基,添加FBS、生长因子和双抗
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代特性:可传5-10代,3代以内细胞状态最佳
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
培养条件:气相:空气,95%;CO₂,5%;温度:37℃
质量检测 quality test
实验室分离的人肝星状体细胞经GFAP免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人肝星状体细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法、并通过星状细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作:超净台紫外灭菌,肝星状细胞专用完全培养基 37℃预热,准备 T25 培养瓶、无菌离心耗材。
快速解冻复苏:冻存管取出液氮,立刻放入 37 ℃水浴快速摇晃融化。
稀释冻存液:酒精消毒冻存管外壁,细胞悬液缓慢加入含 5 mL 预热培养基离心管混匀。
离心收集细胞:1000 rpm,室温离心 5 min。
重悬细胞沉淀:弃上清废液,加入 2‑3 mL 肝星状细胞培养基轻柔吹打重悬。
接种培养瓶:悬液转入 T25 瓶,补培养基至 5 mL,十字摇匀。
培养孵育:37 ℃,5% CO₂培养箱;肝星状细胞贴壁较慢,48‑72 h 再观察,2‑3 天换液。
