人乳牙牙髓干细胞（SHED）是存在于儿童乳牙牙髓组织中的一类间充质干细胞，2003年由科学家首次成功分离。这类细胞具有取材无创、来源广泛、增殖能力强等优势，被认为是再生医学领域极具临床应用前景的干细胞来源之一。
产品属性 product attributes
产品名称: 人乳牙牙髓干细胞
组织来源：儿童自然脱落的乳牙牙髓组织
细胞形态：长梭形或纺锤形，呈成纤维样细胞形态
生长特性：贴壁生长，密度低时常呈放射状排列，高密度时呈漩涡状生长
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数十年
培养基：专用完全培养基，含10-15%胎牛血清、非必须氨基酸、L-谷氨酰胺、青霉素-链霉素双抗
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃；湿度：≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:3至1:5比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的人乳牙牙髓干细胞经CD90/STRO-1免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人乳牙牙髓干细胞采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过牙髓干细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作：超净台紫外灭菌 30 min；牙髓干细胞专用完全培养基（含干细胞添加剂）37℃预热；备好 T25 培养瓶。
快速解冻复苏：液氮取出冻存管，37℃水浴快速摇晃融化。
稀释冻存液：冻存管外壁酒精消毒，细胞悬液缓慢滴入 5 mL 预热干细胞培养基混匀。
离心收集细胞：1000 rpm，室温离心 5 min。
轻柔重悬：弃上清废液，加入 2‑3 mL 干细胞完全培养基，轻柔缓慢吹打，干细胞避免剧烈损伤。
接种：悬液转入 T25 瓶，补足培养基至 5 mL，十字摇晃均匀。
干细胞培养孵育：37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱；48 h 观察贴壁，2‑3 天换液，干细胞避免过早传代。
