人小肠上皮细胞是构成小肠黏膜屏障的核心细胞，分离自十二指肠、空肠或回肠组织。小肠作为人体消化吸收的主要场所，其黏膜表面布满环形皱襞和小肠绒毛，上皮细胞紧密排列形成绒毛表层，使小肠吸收面积扩大约600倍。
产品属性 product attributes
产品名称: 人小肠上皮细胞
组织来源：人正常小肠组织
细胞形态：上皮细胞样，多角形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，需依赖细胞外基质支撑
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)或Matrigel基质胶包被培养瓶
培养基：上皮细胞专用培养基，添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素、转铁蛋白等生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
质量检测 quality test
实验室分离的人小肠上皮细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人小肠上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作：超净台紫外灭菌，小肠上皮细胞专用完全培养基 37℃预热，准备 T25 瓶、离心耗材。
冻存细胞解冻：冻存管取出，37℃水浴快速摇晃融化冻存液。
稀释悬液：冻存管酒精消毒，细胞悬液缓慢加入 5 mL 预热培养基混匀。
离心沉淀：1000 rpm 室温离心 5 min。
重悬细胞：弃上清废液，2‑3 mL 完全培养基轻柔吹打重悬。
接种铺瓶：悬液转入 T25 瓶，补足培养基 5 mL，十字摇匀。
孵育培养：37℃ 5% CO₂培养箱；小肠上皮较脆弱，次日镜检贴壁，2‑3 天换液。
