人脂肪前体细胞是存在于脂肪组织中的未成熟脂肪细胞,具有增殖和分化为成熟脂肪细胞的能力。这类细胞在脂肪组织再生和代谢研究中具有重要价值,可用于研究脂肪形成机制、肥胖及相关代谢性疾病的发病机理。
产品属性 product attributes
产品名称: 人脂肪前体细胞
组织来源:人正常脂肪组织
细胞形态:长梭形或纺锤形,呈成纤维细胞样
生长特性:贴壁生长,密度低时呈放射状排列,高密度时呈漩涡状
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:DMEM/F12培养基,添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
质量检测 quality test
实验室分离的人脂肪前体细胞经CD90/CD44免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人脂肪前体细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过脂肪干细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作:超净台紫外灭菌 30 min,脂肪前体细胞专用完全培养基 37℃预热,备好 T25 培养瓶。
冻存细胞解冻复苏:冻存管取出液氮,37℃水浴快速摇晃融化。
稀释细胞悬液:冻存管酒精消毒,细胞悬液缓慢滴入 5 mL 预热培养基混匀。
离心沉淀细胞:1000 rpm 室温离心 5 min。
重悬沉淀:弃上清废液,2‑3 mL 脂肪前体细胞培养基轻柔吹打重悬。
接种铺瓶:悬液转入 T25 瓶,补足培养基至 5 mL,十字摇匀。
孵育培养:37 ℃ 5% CO₂培养箱;48 h 观察贴壁,2‑3 天换液。
