人源肝窦内皮细胞位于肝窦腔内，是肝脏微循环的重要组成部分。这类细胞具有独特的筛板结构，调节肝窦内血浆与肝细胞之间的物质交换，参与肝脏免疫监视、白细胞招募和肝窦微循环调节，在肝纤维化、肝再生等病理过程中发挥重要作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源肝窦内皮细胞
组织来源：人正常肝脏组织
细胞形态：扁平多角形或短梭形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，接触抑制明显
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：内皮细胞专用培养基，添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：推荐使用Ⅰ型胶原蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源肝窦内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源肝窦内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作：超净台紫外灭菌；肝窦内皮专用完全培养基 37℃预热，明胶包被 T25 培养瓶备用。
冻存细胞解冻：冻存管取出液氮，37℃水浴快速摇晃融化。
稀释悬液：冻存管外壁酒精消毒，细胞悬液缓慢滴入 5 mL 预热培养基混匀。
离心沉淀：1000 rpm 室温离心 5 min。
重悬细胞：弃上清废液，2‑3 mL 肝窦内皮培养基轻柔吹打重悬。
接种包被瓶：悬液转入包被 T25 瓶，补足培养基 5 mL，十字摇匀。
孵育培养：37℃、5% CO₂培养箱；肝窦内皮贴壁较慢，48‑72 h 观察，2‑3 天换液。
