人外周血CD8+细胞毒性T细胞是细胞免疫的主要执行者，通过识别MHC-I类分子递呈的抗原肽特异性杀伤靶细胞。CD8+T细胞在清除病毒感染细胞和肿瘤细胞中发挥核心作用，其功能与肿瘤免疫治疗和病毒感染清除密切相关。
产品属性 product attributes
产品名称: 人外周血CD8+细胞毒性T细胞
组织来源：人外周血
细胞形态：圆形悬浮细胞，体积较小
生长特性：悬浮生长，需免疫激活后才能增殖
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：RPMI 1640培养基，添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗、IL-2
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代特性：为悬浮细胞，无需传代，可通过补充培养基维持
刺激因子：需添加IL-2和CD3/CD28免疫磁珠激活
质量检测 quality test
实验室分离的人外周血CD8+细胞毒性T细胞经CD8免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人外周血CD8+细胞毒性T细胞采用密度梯度离心法结合免疫磁珠分选法制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作：超净台紫外灭菌；CD8+ T 淋巴细胞完全培养基 37℃预热，悬浮培养瓶备好。
冻存细胞解冻复苏：冻存管取出液氮，37℃水浴快速晃动融化。
稀释冻存液：冻存管外壁酒精消毒，细胞悬液缓慢滴入 5 mL 预热培养基混匀。
离心沉淀：1000 rpm 室温离心 5 min。
重悬细胞沉淀：弃上清废液，2‑3 mL 培养基轻柔吹打重悬。
悬浮接种：悬液转入悬浮 T25 瓶，补足培养基 5 mL 轻柔混匀。
孵育培养：37 ℃、5% CO₂培养箱；悬浮细胞 2‑3 天半量换液，监测活率。
