人外周血CD19+B细胞是体液免疫的核心细胞,通过产生特异性抗体介导体液免疫应答。B细胞可分化为浆细胞分泌抗体,或分化为记忆B细胞维持长期免疫记忆,在抗感染免疫和疫苗应答中发挥关键作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 人外周血CD19+B细胞
组织来源:人外周血
细胞形态:圆形悬浮细胞,体积较大
生长特性:悬浮生长,部分可自发增殖
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:RPMI 1640培养基,添加10%胎牛血清、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代特性:为悬浮细胞,无需传代,可通过补充培养基维持
刺激因子:可添加CD40L和IL-4激活增殖
质量检测 quality test
实验室分离的人外周血CD19+B细胞经CD19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人外周血CD19+B细胞采用密度梯度离心法结合免疫磁珠分选法制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作:超净台紫外灭菌;B 淋巴细胞专用完全培养基 37℃预热,悬浮培养瓶备好。
冻存细胞解冻复苏:冻存管取出液氮,37℃水浴快速晃动融化。
稀释冻存液:冻存管外壁酒精消毒,细胞悬液缓慢滴入 5 mL 预热培养基混匀。
离心收集细胞:1000 rpm 室温离心 5 min。
重悬沉淀:弃上清废液,加入 2‑3 mL B 细胞培养基轻柔吹打重悬。
悬浮接种:悬液转入悬浮 T25 瓶,补足培养基 5 mL 轻柔混匀。
孵育培养:37 ℃、5% CO₂培养箱;2‑3 天半量换液,观察细胞状态。
