人源胚胎脑血管周细胞位于脑毛细血管内皮细胞基底膜外侧,是脑血管单元的重要组成部分。周细胞通过收缩调节脑微循环血流,维持血脑屏障完整性,参与脑发育、神经血管偶联和脑损伤修复,在阿尔茨海默病等神经退行性疾病中发挥重要作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源胚胎脑血管周细胞
组织来源:人胚胎脑组织
细胞形态:长梭形或不规则形,伸出多个细长分支
生长特性:贴壁生长,密度低时呈放射状排列
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:周细胞专用培养基,添加FBS、青霉素-链霉素双抗
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化2-3分钟
包被条件:推荐使用多聚赖氨酸包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源胚胎脑血管周细胞经PDGFR-β免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源胚胎脑血管周细胞采用组织消化法结合差速贴壁法、并通过周细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作:超净台紫外灭菌;脑血管周细胞专用完全培养基 37℃水浴预热;备好 T25 培养瓶。
冻存细胞解冻复苏:冻存管取出液氮,37℃水浴快速晃动 1‑2 min 融化。
稀释冻存液:冻存管外壁酒精消毒,细胞悬液缓慢滴入 5 mL 预热培养基混匀。
离心沉淀细胞:1000 rpm 室温离心 5 min。
轻柔重悬沉淀:弃上清废液,加入 2‑3 mL 周细胞培养基轻柔吹打重悬。
接种铺瓶:悬液转入 T25 培养瓶,补足培养基 5 mL,十字摇匀。
孵育培养:37℃、5% CO₂培养箱;周细胞贴壁较慢,72 h 观察状态,2‑3 天换液。
