人源胚胎星状胶质细胞是中枢神经系统中数量最多的胶质细胞，通过终足包裹脑血管参与血脑屏障构成。星形胶质细胞具有支持神经元、调节突触传递、维持离子稳态和清除神经递质等功能，在脑发育、神经保护和神经退行性疾病中发挥关键作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源胚胎星状胶质细胞
组织来源：人胚胎脑组织
细胞形态：星形或不规则形，伸出多个放射状突起
生长特性：贴壁生长，密度低时呈放射状排列
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：星形胶质细胞专用培养基，添加FBS、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化2-3分钟
包被条件：推荐使用多聚赖氨酸包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源胚胎星状胶质细胞经GFAP免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源胚胎星状胶质细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法、并通过星状细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：取出冻存管 37℃水浴快速摇晃 1‑2 min 融化；75% 酒精擦拭管壁；移入含完全培养基离心管，1000 rpm 离心 5 min；弃上清，加星形胶质细胞专用完全培养基重悬；接种于包被多聚‑L‑赖氨酸培养瓶，置于 37℃、5% CO₂培养箱。
细胞换液：复苏后 24 h，弃旧培养基；PBS 轻轻漂洗细胞单层 1 次；加入新鲜预热星形胶质细胞完全培养基；放回培养箱，之后每 2‑3 天换液一次。
细胞传代：细胞汇合度达 80‑85% 开始传代；弃培养基，PBS 清洗 2 次；加入胰蛋白酶‑EDTA 消化液，37℃孵育 2‑5 min；显微镜下见胞体回缩、间隙变大；加入含血清完全培养基终止消化。
细胞消化收集：吹打瓶壁制成单细胞悬液；转移悬液至离心管；1000 rpm 离心 5 min；弃上清，新鲜培养基重悬；按 1:2~1:3 比例分瓶接种。
细胞冻存：取对数生长期细胞；消化离心收集沉淀；加入预配制无血清细胞冻存液重悬；调整细胞密度 1×10⁶‑2×10⁶ 个 /mL；分装冻存管；程序降温后转入‑196℃液氮长期保存。
细胞形态观察鉴定：倒置显微镜观察；正常星形胶质细胞呈星芒状、胞体大、多突起；免疫荧光 GFAP 标志物染色鉴定纯度。
细胞污染应急处理：发现培养基浑浊、真菌菌丝、大量悬浮死细胞；立刻移出培养箱隔离；丢弃污染细胞；培养瓶台面 75% 酒精消毒；剩余细胞全部换液，加适量双抗观察后续状态。
