人源宫颈上皮细胞覆盖于宫颈表面，构成宫颈黏膜屏障。这类细胞通过分泌黏液维持宫颈局部微环境，参与生殖道免疫防御，是研究HPV感染、宫颈癌前病变和宫颈癌发生发展的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源宫颈上皮细胞
组织来源：人正常宫颈组织
细胞形态：上皮细胞样，多角形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，需依赖细胞外基质支撑
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：上皮细胞专用培养基，添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素等生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源宫颈上皮细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源宫颈上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管；酒精擦拭管壁；细胞悬液加到宫颈上皮完全培养基；离心弃上清；重悬接种于 Ⅰ 型胶原包被瓶，放入培养箱。
细胞换液：复苏 24 h 换液；PBS 轻洗单层细胞；预热新鲜宫颈上皮完全培养基；每 2‑3 天换液一次。
细胞传代：细胞汇合 80%；弃培养基 PBS 清洗 2 次；胰酶‑EDTA 消化 3‑5 min；镜下细胞回缩变圆；上皮完全培养基终止消化。
细胞消化收集：轻柔吹打瓶壁，单细胞悬液；离心重悬；传代比例 1:2‑1:3。
细胞冻存：收集对数生长期细胞沉淀；上皮冻存液重悬；1‑2×10⁶/mL；分装冻存管，程序降温液氮保存。
细胞形态观察鉴定：多边形上皮样；细胞角蛋白 CK 标志物染色鉴定。
细胞污染应急处理：污染瓶立即移出丢弃；操作台 75% 酒精 + 紫外消毒；剩余细胞换液加双抗监控。
