人源肾小球微血管内皮细胞覆盖于肾小球毛细血管襻内壁，是肾小球滤过屏障的重要组成部分。这类细胞与足细胞和基底膜共同构成滤过屏障，调节肾小球通透性，在蛋白尿、肾小球肾炎和糖尿病肾病等肾脏疾病中发挥关键作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源肾小球微血管内皮细胞
组织来源：人正常肾脏组织
细胞形态：多角形或短梭形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，接触抑制明显
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：内皮细胞专用培养基，添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源肾小球微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源肾小球微血管内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：冻存管 37℃水浴快速融化；75% 酒精消毒外壁；细胞悬液转移至肾小球内皮完全培养基；离心弃上清；重悬后接种于 Ⅰ 型胶原包被培养瓶；37℃ 5% CO₂培养。
细胞换液：复苏 24 h 换液；PBS 轻洗细胞层；更换预热肾小球微血管内皮完全培养基；每 2‑3 天换液一次。
细胞传代：汇合度 75‑80%；弃培养液，PBS 洗 2 遍；胰酶‑EDTA 短时间消化 2‑4 min；镜下细胞回缩；含血清培养基终止消化。
细胞消化收集：轻柔吹打瓶壁收集细胞悬液；离心；弃上清重悬；传代比例建议 1:2，肾小球内皮细胞增殖能力有限，不要多次传代。
细胞冻存：取低代次对数生长期细胞；内皮冻存液重悬，1‑2×10⁶细胞 /mL；分装冻存管，程序降温液氮长期保存。
细胞形态观察鉴定：镜下多边形铺路石形态；CD31、vWF、VE‑cadherin 免疫标记鉴定。
细胞污染应急处理：污染细胞立即丢弃隔离；超净台紫外 + 酒精消毒；剩余细胞换液，加双抗监控。
