人源胰腺微血管内皮细胞构成胰腺微循环血管壁内层，为胰岛和腺泡细胞提供氧气和营养。这类细胞通过分泌生长因子和细胞因子调节胰岛β细胞功能，参与胰腺炎症反应和缺血损伤，在糖尿病和胰腺炎研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源胰腺微血管内皮细胞
组织来源：人正常胰腺组织
细胞形态：多角形或短梭形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，接触抑制明显
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：内皮细胞专用培养基，添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源胰腺微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源胰腺微血管内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：37℃水浴快速融化冻存管；酒精擦拭管壁；细胞悬液加入胰腺微血管内皮完全培养基；离心 5 min 弃上清；重悬接种于明胶包被瓶，放入培养箱。
细胞换液：复苏后 24 h 首次换液；PBS 漂洗；加入新鲜预热完全培养基；每 2‑3 天换液。
细胞传代：汇合 75‑80%；弃培养基，PBS 清洗；胰酶‑EDTA 消化 2‑4 min；镜下细胞变圆；内皮培养基终止消化。
细胞消化收集：缓慢吹打瓶壁收集单细胞悬液；离心 1000 rpm 5 min；重悬，1:2 分瓶接种。
细胞冻存：收集对数生长期细胞沉淀；内皮细胞冻存液重悬；细胞浓度 1‑2×10⁶/mL；分装冻存管，程序降温液氮保存。
细胞形态观察鉴定：鹅卵石样单层；CD31、vWF 内皮标志物免疫荧光鉴定。
细胞污染应急处理：污染样本隔离丢弃；台面彻底消毒；剩余细胞换液加双抗，每日观察。
