人源肺微血管上皮细胞构成肺微血管壁外层，参与肺气血屏障的构成。这类细胞与微血管内皮细胞共同构成血气屏障，调节气体交换和肺微血管通透性，在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和肺纤维化等疾病中发挥重要作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源肺微血管上皮细胞
组织来源：人正常肺组织
细胞形态：上皮细胞样，多角形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，需依赖细胞外基质支撑
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：上皮细胞专用培养基，添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素、转铁蛋白等生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)或Matrigel基质胶包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源肺微血管上皮细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源肺微血管上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：冻存管 37℃水浴快速融化；酒精消毒管壁；细胞悬液移入肺上皮专用完全培养基；离心弃上清；重悬接种于胶原包被培养瓶；37℃ 5% CO₂培养箱。
细胞换液：复苏 24 h 换液；PBS 轻洗细胞层；添加预热新鲜肺微血管上皮完全培养基；每 2‑3 天换液。
细胞传代：细胞汇合 80%；弃培养液，PBS 洗涤 2 次；胰酶‑EDTA 消化 3‑5 min；镜下细胞回缩变圆；上皮完全培养基终止消化。
细胞消化收集：轻柔吹打瓶壁，制成单细胞悬液；离心 1000 rpm 5 min；弃上清重悬；传代比例 1:2‑1:3。
细胞冻存：收集对数生长期细胞沉淀；上皮细胞冻存液重悬；1‑2×10⁶细胞 /mL；分装冻存管，程序降温液氮保存。
细胞形态观察鉴定：多边形上皮样形态；E‑cadherin 上皮标志物染色鉴定。
细胞污染应急处理：污染瓶移出丢弃；超净台消毒；其余细胞换液添加双抗，连续观察。
