人源小肠微血管内皮细胞构成小肠黏膜微循环血管壁内层，为肠上皮细胞提供氧气和营养。这类细胞调节肠道微血管通透性和免疫细胞归巢，参与肠道炎症反应和黏膜屏障维护，在炎症性肠病(IBD)和肠道损伤修复中发挥重要作用。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源小肠微血管内皮细胞
组织来源：人正常小肠组织
细胞形态：多角形或短梭形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，接触抑制明显
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：内皮细胞专用培养基，添加FBS、内皮细胞生长因子(ECGF)、肝素、青霉素-链霉素双抗
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：推荐使用明胶或纤维连接蛋白包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源小肠微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源小肠微血管内皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：37℃水浴快速解冻冻存细胞；酒精擦拭管壁；悬液加到小肠微血管内皮完全培养基；离心 5 min 弃上清；重悬，明胶包被瓶接种，培养箱孵育。
细胞换液：复苏 24 h 首次换液去除死碎片；PBS 漂洗单层；预热新鲜内皮完全培养基；每 2‑3 天换液。
细胞传代：汇合 75‑80%；弃培养基 PBS 清洗；胰酶‑EDTA 消化 2‑4 min；镜下细胞收缩；血清培养基终止消化。
细胞消化收集：轻柔吹打瓶壁，单细胞悬液；离心重悬；1:2 分瓶接种，小肠微血管内皮避免过度消化损伤。
细胞冻存：收集健康对数期细胞沉淀；内皮冻存液重悬；1‑2×10⁶/mL；分装冻存管，液氮长期保存。
细胞形态观察鉴定：鹅卵石铺路石样；CD31、vWF 内皮标志物鉴定。
细胞污染应急处理：污染细胞隔离丢弃；操作台灭菌；剩余细胞换液加双抗监测。
