人源支气管上皮细胞覆盖于支气管腔面，构成气道黏膜屏障的第一道防线。这类细胞通过分泌黏液和抗菌肽抵御病原体入侵，通过纤毛运动清除异物，参与气道免疫防御和损伤修复，是研究哮喘、慢性支气管炎和肺癌等呼吸系统疾病的重要模型。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源支气管上皮细胞
组织来源：人正常支气管组织
细胞形态：上皮细胞样，柱状或多角形，呈铺路石状排列
生长特性：贴壁生长，需依赖细胞外基质支撑
保存条件：冻存细胞可在-80℃保存1个月，液氮中长期保存可达数年
培养基：上皮细胞专用培养基，添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素、转铁蛋白等生长添加剂
培养环境：37℃、5%CO₂培养箱，湿度≥95%
换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例：细胞融合度达80-90%时，按1:2至1:3比例传代
消化液：0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源支气管上皮细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源支气管上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏：冻存管 37℃水浴速融；酒精消毒外壁；细胞悬液转入支气管上皮细胞专用完全培养基；离心弃上清；重悬接种于胶原包被培养瓶；37℃、5% CO₂培养。
细胞换液：复苏 24 h 换液；PBS 轻洗细胞；更换预热支气管上皮完全培养基；每 2‑3 天换液。
细胞传代：汇合度 80%；弃培养液 PBS 洗涤；胰酶‑EDTA 消化 3‑5 min；镜下细胞变圆回缩；上皮完全培养基终止消化。
细胞消化收集：缓慢吹打瓶壁，获得单细胞悬液；离心 5 min 1000 rpm；弃上清重悬；传代比例 1:2‑1:3；支气管上皮不要反复吹打。
细胞冻存：取低代次健康细胞；上皮冻存液重悬；1‑2×10⁶细胞 /mL；分装冻存管，程序降温液氮保存。
细胞形态观察鉴定：多边形铺路石样；CK‑19、E‑cadherin 上皮标志物鉴定。
细胞污染应急处理：污染样本丢弃隔离；超净台全面消毒；剩余细胞换液添加双抗，连续观察。
