人源卵巢表面上皮细胞覆盖于卵巢表面,构成卵巢浆膜层。这类细胞在排卵过程中参与卵泡破裂和修复,是卵巢癌(特别是浆液性癌)的主要起源细胞,在卵巢癌发生机制和早期诊断研究中具有重要价值。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源卵巢表面上皮细胞
组织来源:人正常卵巢表面组织
细胞形态:上皮细胞样,多角形或扁平形,呈铺路石状排列
生长特性:贴壁生长,需依赖细胞外基质支撑
保存条件:冻存细胞可在-80℃保存1个月,液氮中长期保存可达数年
培养基:上皮细胞专用培养基,添加10%胎牛血清、表皮生长因子(EGF)、胰岛素等生长添加剂
培养环境:37℃、5%CO₂培养箱,湿度≥95%
换液频率:每2-3天更换一次新鲜培养基
传代比例:细胞融合度达80-90%时,按1:2至1:3比例传代
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,37℃消化1-2分钟
包被条件:鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm²)包被培养瓶
质量检测 quality test
实验室分离的人源卵巢表面上皮细胞经Cytokeratin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源卵巢表面上皮细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
细胞复苏:37℃水浴快速融化冻存管;酒精擦拭管壁;细胞悬液转入卵巢上皮完全培养基;离心 5 min 弃上清;重悬接种于胶原包被培养瓶,培养箱孵育。
细胞换液:复苏 24 h 换液;PBS 轻洗细胞;更换预热卵巢上皮完全培养基;每 2‑3 天换液。
细胞传代:汇合度 80%;弃培养液 PBS 洗涤;胰酶‑EDTA 消化 3‑5 min;镜下细胞回缩;上皮完全培养基终止消化。
细胞消化收集:缓慢吹打瓶壁收集单细胞悬液;离心重悬;传代比例 1:2‑1:3。
细胞冻存:收集低代次对数生长期细胞沉淀;上皮冻存液重悬;1‑2×10⁶/mL;分装冻存管液氮长期保存。
细胞形态观察鉴定:扁平多边形上皮样;细胞角蛋白 CK 标志物鉴定。
细胞污染应急处理:污染瓶丢弃隔离;操作台灭菌;剩余细胞换液添加双抗监测。
