分离自支气管组织,支气管是连接气管与肺的管状结构,以"C"型软骨为支架维持气道开放。这类细胞是气道张力的主要调节者,其收缩和舒张直接影响气道直径,与支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)等呼吸系统疾病的发生发展密切相关。
产品属性 product attributes
产品名称: 人源支气管平滑肌细胞
组织来源:人正常支气管组织
细胞形态:长梭状细胞,成纤维细胞样
生长特性:贴壁培养,密度低时常交织成网状,高密度时排列为旋涡状或栅栏状
保存条件:冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月,或在液氮中长期保存
培养基:含FBS、生长添加剂、青霉素-链霉素双抗的专用培养基
换液频率:每2-3天换液一次
传代特性:可传5代左右,3代以内细胞状态最佳
消化液:0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液
培养条件:气相:空气,95%;CO₂,5%;温度:37℃
质量检测 quality test
实验室分离的人源支气管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介 method
实验室分离的人源支气管平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法、并通过平滑肌细胞专用培养基培养筛选制备而来。
操作步骤 operation steps
准备工作:超净台紫外消毒 30 min,支气管平滑肌专用完全培养基 37℃水浴预热,备好 T25 培养瓶、离心管。
冻存细胞复苏解冻:冻存管取出,37℃水浴快速晃动 1‑2 min 至完全融化。
稀释细胞悬液:冻存管外壁酒精擦拭,将细胞悬液缓慢滴入 5 mL 预热完全培养基中混匀。
离心沉淀:配平离心,1000 rpm,室温离心 5 min。
轻柔重悬:丢弃上清液,加入 2‑3 mL 支气管平滑肌完全培养基,缓慢吹打重悬细胞,减少机械损伤。
接种铺瓶:细胞悬液转移入 T25 瓶,补培养基至 5 mL,十字摇匀。
培养箱孵育:置于 37 ℃,5% CO₂饱和湿度培养箱;48 h 镜检贴壁情况,每 2‑3 天换液。
